SELETC-m6A單位點修飾定量檢測技術試劑盒和技術服務
產品簡介
SELECT-m6A修飾定量檢測技術
SELECT（single-base elongation-and ligation-based qPCR amplification method）[1]檢測技術，即單堿基延長和連接的qPCR擴增技術，研發團隊為北京大學賈桂芳課題組，隻需三小時就能完成低豐度轉錄本中單堿基分辨率的m6A檢測，無需抗體富集就能夠針對性地對特定位點進行 m6A修飾定量，樣本間修飾豐度差異分析以及鑒定目標位點是否存在m6A修飾。
表觀生物與北京大學簽訂SELECT-m6A修飾定量檢測技術轉讓（專利實施許可）協議，獲得全球範圍內實施SELECT-m6A修飾定量檢測技術成果轉化的授權，為客戶提供多款SELECT檢測試劑盒，填補市場上特定位點m6A 常規檢測技術的空白，協助研究者鑒定m6A相關蛋白的作用靶點，深入挖掘m6A修飾的作用機製，有望為RNA m6A修飾分子標誌物的發現帶來新突破。
技術流程
應用與優勢
技術應用
1. 驗證樣本間特定位點m6A修飾豐度差異
2. 檢測RNA目標位點是否存在m6A修飾
3. 對特定位點的m6A修飾豐度進行絕對定量
4. 鑒定m6A修飾相關蛋白的作用靶點
技術優勢
1. 熒光定量PCR進行精確定量，達到單堿基分辨率
2. 無需抗體IP，無需同位素標記，降低成本，可操作性高
3. 靈敏度高，總RNA所需樣本低至1μg
技術對比
試劑盒信息
圖1. qPCR擴增曲線和CT值柱形圖顯示，HeLa細胞lncRNA MALAT1 （e）以及HEK293T細胞mRNA H1F0（f）的m6A位點和非m6A位點[1]
應用示例
1. 檢測RNA目標位點是否存在m6A修飾
圖2. 利用係列濃度梯度的已知m6A成分標準品製作標準曲線，然後對特定位點上的m6A修飾成分進行定量[1]
2. m6A對特定位點的m6A修飾豐度進行絕對定量
圖3. SELECT分析 lncRNA MALAT1和以及METTL3+/-細胞（對照組）的m6A2515和A2511（input對照）位點，熒光擴增曲線和qPCR CT值柱狀圖顯示lncRNA MALAT1的2515位點是METTL3的一個靶點[1]
3. 鑒定m6A修飾相關蛋白（甲基化酶、去甲基化酶、 識別蛋白等）的靶點
圖4. 3e和3g分別展示了TDE（去甲基化編輯器）和TME（甲基化編輯器）對GhECA1轉錄本3' UTR區域m6A水平的調控效果
客戶文章
1. Adv Sci：CRISPR/dCas13(Rx)介導的RNA m6A動態編輯係統增強棉花抗旱性研究[2]
這項研究開發了基於CRISPR/dCas13(Rx)的可編程RNA m6A編輯工具（TME和TDE），通過融合甲基轉移酶GhMTA或去甲基酶GhALKBH10，實現對植物內源轉錄本GhECA1和GhDi19特定m6A位點的動態修飾。
研究中使用SELECT試劑盒驗證GhECA1轉錄本3' UTR區域和GhDi19轉錄本5' UTR區域的m6A修飾效率：TDE編輯器使GhECA1的m6A水平降低24%-76%，並導致其mRNA豐度下降；而TME編輯器使GhECA1的m6A富集增加1.37-2.51倍，並上調其表達。同時，在GhDi19的5' UTR區域，TDE顯著降低m6A水平（32%-76%）並促進轉錄，而TME提高m6A水平（1.43-2.52倍）抑製表達。
![2. Acta Pharmacol Sin：METTL14介導pri-miR-5099的m6A甲基化驅動心肌梗死中心肌細胞焦亡的分子機製[3]](http://openapi.whaleng.com/file-server/ep/2026/01/be0966a4389a40c19616a9d492e949b2.png)
圖5. 通過表觀生物SELECT試劑盒（Epi-SELECT m6A Site Identification Kit with FTO-assisted step）驗證pri-miR-5099序列中是否存在特異性m6A甲基化位點
2. Acta Pharmacol Sin：METTL14介導pri-miR-5099的m6A甲基化驅動心肌梗死中心肌細胞焦亡的分子機製[3]
這篇文章揭示了METTL14介導的m6A甲基化通過調控pri-miR-5099加工促進心肌細胞焦亡的分子機製。研究應用SELECT試劑盒對pri-miR-5099的m6A甲基化位點進行了特異性檢測。通過FTO去甲基化酶處理和EDTA對照實驗，比較兩組樣本的qPCR循環閾值差異，證實了pri-miR-5099序列中存在特異性m6A修飾位點。
該檢測為後續機製研究提供了關鍵證據，證明METTL14介導的m6A甲基化增強了DGCR8對pri-miR-5099的識別，從而促進其加工為成熟miR-5099-3p。這一發現將RNA表觀遺傳修飾與心肌梗死病理過程聯係起來，揭示了METTL14/miR-5099-3p/ELF1調控軸在心肌細胞焦亡中的核心作用，為心肌保護提供了新的治療靶點。
![3. Nat Commun：基於RNA m6A修飾的吸收電離輻射劑量估算biomarker[4]](http://openapi.whaleng.com/file-server/ep/2026/01/1a2c8e6c91a44dc0830cf0fb974b610c.png)
圖6. 研究者使用表觀生物提供的SELECT試劑盒來進一步評估m6A在Ncoa4轉錄本4個位點對IR的反應模式，結果顯示其中三個在照射後7天和14天都顯示出m6A水平顯著升高，並且升高的範圍與暴露劑量明顯相關，與meRIP-qPCR結果一致
3. Nat Commun：基於RNA m6A修飾的吸收電離輻射劑量估算biomarker[4]
這項研究首次發現了基於RNA m6A修飾的新型輻射暴露劑量biomaker，並建立了基於該修飾的人體輻射暴露劑量預測模型。為了證實Ncoa4 m6A水平對IR的響應曲線，研究者使用了單堿基分辨率、不依賴於抗體的m6A檢測方法SELECT。結果顯示，四個靶位點中的三個（如圖3）在照射後7天和14天都表現出顯著升高的m6A水平，並且升高的範圍與照射劑量明顯相關。
![4. Cell Rep：m6A 修飾的長鏈非編碼RNA 調控神經元發育及其機製[5]](http://openapi.whaleng.com/file-server/ep/2026/01/f33ce13c529d42f487f95871de4e8762.png)
圖7. 研究者使用表觀生物提供的SELECT-m6A 修飾單位點定量檢測試劑盒，鑒定Dubr m6A甲基化位點，qPCR顯示，FTO處理顯著減少ND7/23細胞RNA裂解液的4 個Dubr位點的m6A修飾水平，ND7/23細胞RNA裂解液的4個Dubr位點，表明Dubr m6A修飾位點的特異性，所以說，Dubr保守區域的4個motif是它們的m6A修飾所必須的
4. Cell Rep：m6A 修飾的長鏈非編碼RNA 調控神經元發育及其機製[5]
這項研究揭示了長鏈非編碼RNA (lncRNA) Dubr 的m6A修飾通過穩定YTHDF1/3 複合體以及介導mRNA 翻譯調控神經元軸突生長和遷移及其機製。
參考文獻與SELECT已發表文章（部分）：
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